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Uso de dos análogos de superóxido dismutasa para prevenir la desestabilización espermática prematura durante la criopreservación y vitrificación en espermatozoides de alpaca
Uso de dos análogos de superóxido dismutasa para prevenir la desestabilización espermática prematura durante la criopreservación y vitrificación en espermatozoides de alpaca
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Fecha
2012
Autores
Santiani Acosta, Alexei Vicent
Título de la revista
Revista ISSN
Título del volumen
Editor
Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Proyectos de investigación
Unidades organizativas
Número de la revista
Abstracto
El presente trabajo consta de 3 experimentos y tuvo como objetivo principal demostrar el efecto nocivo de especies reactivas de oxígeno (ROS) en la funcionalidad de espermatozoides de alpacas y evaluar el efecto de 2 antioxidantes análogos de superóxido dismutasa durante la criopreservación de semen. En el Experimento 1, 15 muestras de espermatozoides obtenidos de la cola del epidídimo y 5 muestras de semen de alpaca fueron vitrificadas en medios Tris base y HTF utilizando diferentes azúcares (fructosa, sacarosa y trehalosa) en 3 concentraciones diferentes (0.25, 0.5 y 1.0 M). Sólo se obtuvo menos de 1% de motilidad y menos de 5% de viabilidad utilizando el medio HTF.. En el experimento 2, espermatozoides frescos de alpaca fueron incubados durante 3 horas a 37 °C en un medio Tris-base junto con polimorfos nucleares activados con 100 mM de PMA (Phorbol myristate acetate) para inducir la formación de ROS. Se demostró que la motilidad espermática se reduce significativamente (p< 0.05) en el grupo con inducción de formación de ROS (13.67%) en comparación con el grupo control (22.42%). En el Experimento 3, se evaluó el efecto de 2 antioxidantes análogos de superóxido dismutasa (Tempo y Tempol) durante el proceso de criopreservación en un medio en base a leche descremada y etilenglicol, encontrando que con la adición de Tempol 1mM se obtiene una mayor (p<0.05) motilidad espermática en comparación al grupo control (22.08% vs. 11.21%, respectivamente) y se reduce (p<0.05) la fragmentación del ADN (16.72% vs. 38.76%, respectivamente). Las variables espermáticas de función celular como integridad funcional de membrana y vitalidad/integridad acrosomal no fueron afectadas significativamente por niveles elevados de ROS, ni su pérdida parcial durante la criopreservación fue prevenida mediante la adición de antioxidantes. Se concluye que las especies reactivas de oxígeno tienen un efecto nocivo en la motilidad de espermatozoides de alpaca, y que durante la criopreservación de semen la pérdida de motilidad espermática e incremento de la fragmentación del ADN espermático puede ser prevenido parcialmente mediante la utilización del antioxidante Tempol 1 mM como parte del dilutor de semen.
Descripción
Al Consejo Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación Tecnológica (CONCYTEC) por haberme otorgado el financiamiento para poder realizar mis estudios de doctorado.
Palabras clave
Alpacas - Reproducción,
Alpacas - Espermatozoides