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Título : Técnica molecular de PCR para identificar las principales especies de Meloidogyne spp. en poblaciones provenientes de Perú
Autor : Vera Obando, Nora Yessenia
Palabras clave : Meloidogyne
Fecha de publicación : 2014
Editorial : Universidad Nacional Agraria La Molina
Resumen : La correcta y confiable identificación de nematodos fitoparásitos del género Meloidogyne es importante para poder llevar a cabo estrategias de manejo integrado, mejoramiento y cuarentena. Por ello, se requiere la aplicación de técnicas complementarias y confirmatorias como la PCR (Reacción en cadena de la polimerasa), para apoyar la identificación de especies realizada por métodos morfológicos y morfométricos. En el presente trabajo se aisló 30 poblaciones a partir de una sola masa de huevos correspondientes al género Meloidogyne procedentes de diferentes partes del país, se adoptó métodos de extracción de ácidos nucleicos a partir de uno y 10 juveniles de segundo estado, una y 10 hembras y raíces con nódulos, se aplicó protocolos para la identificación de las especies de M. incognita, M. javanica, M. arenaria y M. hapla mediante la técnica de PCR utilizando iniciadores específicos y se comparó con la identificación morfológica. De las 30 poblaciones en estudio, 25 mostraron productos de amplificación con los iniciadores MIF/MIR e Inc-14k F/Inc-14k R, diseñados para la identificación de M. incognita, concordando con la identificación morfológica según el patrón perineal. Se obtuvo también productos de amplificación con el iniciador Fjav/Rjav para M. javanica en una población afectando tabaco proveniente de Lambayeque, con el iniciador Far/Rar para M. arenaria en una población afectando vid proveniente de Lima y con el primer DHF/DHR para M. hapla en una población afectando aguaymanto proveniente de Cajamarca, concordando estos resultados con la identificación morfológica según el patrón perineal. No se obtuvo productos de amplificación con los iniciadores evaluados en una población de clavel proveniente de Ayacucho y una población que se encontraba afectando vid en Piura, lo cual sugiere que deben realizarse otras pruebas moleculares como secuenciamiento para determinar estás especies. El presente trabajo constituye el primero en utilizar métodos moleculares para la identificación de especies de Meloidogyne realizado en un laboratorio del Perú. Palabras claves: M. incognita, M. javanica, M. arenaria, M. hapla, PCR, iniciadores específicos, patrón perineal.
URI : http://repositorio.concytec.gob.pe/handle/CONCYTEC/123
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